由淡水魚類基因組學(xué)與基因編輯創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)匡友誼等人完成的“斑馬魚成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)方法”獲得國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)，授權(quán)專利號(hào)：ZL202110520788.9。

本發(fā)明涉及一種斑馬魚脊椎骨組織成骨細(xì)胞的培養(yǎng)方法。斑馬魚脊椎成骨細(xì)胞系是開展魚類骨骼發(fā)育機(jī)制研究不可或缺的材料，發(fā)明人利用利用組織塊貼壁法，以斑馬魚脊椎組織為材料成功構(gòu)建了斑馬魚脊椎成骨細(xì)胞系。該方法建立的細(xì)胞系生長(zhǎng)迅速穩(wěn)定，復(fù)蘇狀態(tài)良好，經(jīng)鑒定細(xì)胞系中期分裂相的染色體數(shù)目、核型與斑馬魚一致，堿性磷酸酶、茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色及von Kossa氏礦化結(jié)節(jié)法染色均呈陽性，成骨細(xì)胞發(fā)育標(biāo)志基因runx2a、bglapl和alp的表達(dá)量顯著高于斑馬魚肌肉組織，且流式RNA-FISH檢測(cè)結(jié)果表明98%以上的成骨細(xì)胞均表達(dá)sp7。

本方法簡(jiǎn)單易行且成本較低，有效避免了原代組織用酶消化培養(yǎng)方法作用時(shí)間長(zhǎng)、對(duì)細(xì)胞損傷大、影響細(xì)胞貼壁及成活的問題。